NIBSC 16/250 KRAS基因組密碼子12和13突變國際標準品簡介

品牌：英國NIBSC標準品

CRM code（貨號）：16/250

英文名稱：1st International Reference Panel for genomic KRAS codons 12 and 13 mutations

描述：KRAS基因組密碼子12和13突變國際標準品

產(chǎn)品用途：

該面板由八個單獨編碼的安瓿組成，每個安瓿都含有從人類細胞系中提取的凍干、純化的基因組DNA（gDNA）。該面板包括七種材料，每種材料都有不同的KRAS密碼子12或13基因型、共有突變百分比和共有突變體，以及每二倍體人類基因組的KRAS總拷貝數(shù)。此外，該面板還包括七種KRAS密碼因子12和13基因型的gDNA純合野生型材料（材料代碼16/266）。攜帶感興趣的KRAS突變的材料可以通過應(yīng)用針對每種材料的特定計算來稀釋，以產(chǎn)生KRAS共識突變百分比范圍內(nèi)的標準品。該面板旨在用作校準二級標準品、試劑盒和分析的主要標準。這些材料不作為運行控制。

這些材料經(jīng)過外部實驗室的測試，表明適合作為下一代測序（NGS）、Sanger測序、實時PCR、焦磷酸測序、數(shù)字PCR（dPCR）、基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時間（MALDI-TOF）質(zhì)譜分析（MassARRAY®）、KRAS StripAssay®、高分辨率熔融分析（HRM）、擴增難治性突變系統(tǒng)PCR（ARMS-PCR）、PCR反向序列特異性寡核苷酸探針技術(shù)（PCR-rSSO）、微測序和限制性片段長度多態(tài)性分析（RFLP）的標準品。該小組由世界衛(wèi)生組織（世界衛(wèi)生組織）生物標準化專家委員會于2017年成立，是世界衛(wèi)生組織di一個基因組KRAS密碼子12和13突變、NIBSC代碼16/2501的國際參考小組。這些材料不應(yīng)用于任何其他用途。數(shù)據(jù)分析必須側(cè)重于KRAS。不得試圖確定源材料捐贈者。

該小組在一項涉及56個實驗室和68種測試方法的國際合作研究中進行了測試。從最一致的方法NGS和dPCR中獲得八種材料的基因型和共有突變百分比（表1）。最終用戶能夠使用基于突變體和總KRAS拷貝數(shù)的稀釋公式進一步稀釋突變材料（用野生型KRAS密碼子12和13材料16/266，或校準到材料16/266的另一種野生型基因組DNA），以在較低的共識突變百分比范圍內(nèi)達到進一步的標準，從而可以實現(xiàn)測定校準，見下文第7節(jié)和附錄I。

生物材料原產(chǎn)國：英國。

該小組由八個單獨編碼的安瓿組成，每個安瓿含有約5μg從人類細胞系中提取的凍干純化基因組DNA（16/266材料為25μg）。采用鹽析法提取基因組DNA，在冷凍干燥前用5mg/ml海藻糖在Tris-EDTA緩沖液中稀釋。

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